Optimización de protocolos para la extracción eficiente de ADN a partir de hojas, tallos, flores y semillas de Cannabis sativa L.

Resumen

Cannabis sativa L. se ha convertido en un cultivo de creciente importancia debido a sus aplicaciones en la medicina, la industria y la agricultura. Dada su compleja estructura genética, las distintas regulaciones legales y la creciente demanda de variedades de alta calidad, resulta esencial disponer de métodos confiables para su identificación, clasificación y mejoramiento. La extracción de ADN constituye una técnica clave que permite desarrollar este tipo de investigaciones, sirviendo como base para múltiples aplicaciones en biología molecular. El objetivo de este estudio fue evaluar la eficacia de cuatro métodos de extracción de ADN en muestras frescas de hojas, tallos, flores y semillas de Cannabis sativa. Se utilizaron cuatro tipos de muestras frescas: hojas, tallos, flores y semillas. La extracción de ADN se realizó por triplicado mediante cuatro metodologías: precipitación salina con dodecil sulfato de sodio (SDS), precipitación con acetato de potasio (KA), reactivo DNAzol™ y el kit comercial DNeasy Mini™ de Qiagen (KC, control). La concentración, pureza e integridad del ADN se evaluaron mediante espectrofotometría y electroforesis en gel de agarosa. Además, la eficiencia de amplificación del ADN se analizó mediante reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Los resultados indicaron que el método KA produjo muestras con mayores concentraciones de ADN, mientras que el método SDS presentó ADN de mayor pureza en los cuatro tipos de tejidos. El uso de KC y SDS permitió la amplificación completa por PCR en los cuatro tejidos analizados. En contraste, el método DNAzol alcanzó un 100 % de amplificación únicamente en las muestras de hojas y tallos. En consecuencia, los protocolos SDS y DNAzol representan alternativas viables al método KC, demostrando ser igualmente efectivas, menos laboriosas y más económicas para extracciones de ADN a gran escala.